Подтитровка на антибиотики

Резистентность бактерий к антибиотикам в ветеринарии

Подтитровка на антибиотики

В современной медицине резистентность бактерий к тем препаратам, которые созданы для их уничтожения, считается своеобразным кризисом. С момента изобретения пенициллина развитие лекарственных средств шло в ногу с возникновением популяций устойчивых бактерий, однако за последние десятилетия тенденция изменилась.

Такие бактерии, как Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, S. pyogenes Haemophilus influenzae, которые когда-то успешно уничтожались многими антибиотиками, теперь демонстрируют высокую степень сопротивляемости. Энтерококки и Mycobacterium tuberculosis представляют собой значительную проблему, поскольку пока не существует препаратов, способных излечить вызываемые ими инфекции.

В ветеринарной медицине сопротивляемость бактерий еще не достигла такого уровня, однако количество проблем, вызванных устойчивостью бактерий к препаратам, заметно возросло.

Вообще в ветеринарии существуют уникальные ограничения на лечение устойчивых бактерий, поскольку такая терапия требует использования новых и более дорогих антибиотиков.

Многие из наиболее активных препаратов требуют внутривенных введений несколько раз в день, поэтому такое лечение оказывается возможным далеко не всегда.

Кроме того, в общественном сознании существует определенная озабоченность по поводу использования широкого спектра антибиотиков, созданных для людей, при лечении животных.

Если ветеринарным врачам так нравится эффективность большинства антибактериальных препаратов для лечения людей, то для предотвращения распространения устойчивых бактерий необходимы тщательное наблюдение, разумные предписания и определенная практика.

От чего зависит резистентность?

Бактерии считаются устойчивыми, когда при тестировании in vitro обнаруживается отсутствии их чувствительности к тем препаратам, которыми они раньше успешно уничтожались.

Некоторые бактерии демонстрируют врожденную резистентность, которую не следует путать с приобретенной резистентностью.

Бактерии проявляют врожденную резистентность, если они оказываются нечувствительными к определенным антибиотикам даже без выработки устойчивых плазмид или хромосомных мутаций.

Например, когда у пациента наблюдается инфекция, вызываемая Pseudomonas aeruginosa, то ветеринарный врач может с уверенностью предположить ее «устойчивый» характер, если она относится к «дикому» штамму Pseudomonas, который обладает врожденной резистентностью к большинству бета-лактамных антибиотиков, макролидов, тетрациклинов и комбинаций триметоприм-сульфонамидов. Другой пример врожденной резистентности демонстрируют стрептококки и энтерококки по отношению к фторхинолонам.

Не все нозокомиальные инфекции являются устойчивыми инфекциями, и наоборот. Нозокомиальными инфекциями заражаются в больницах. Однако в результате селекции антибиотиков многие из них приобрели устойчивость к наиболее распространенным антибактериальным препаратам.

Приобретенная резистентность — это появление устойчивости у ранее восприимчивых видов.

Бактерии считаются устойчивыми, если их минимальная ингибирующая концентрация (МИК) превышает определенную контрольную отметку; или небольшую зону подавления в тесте диффузию на агаровом диске, определяемую согласно принятым стандартам. Механизмы, благодаря которым бактерии приобретают устойчивость, можно распределить по трем категориям:

  • уменьшение проникновения антибиотика внутрь бактерии,
  • изменение области поражения,
  • синтез ферментов, которые модифицируют данный препарат.

Лечение резистентных инфекций

Когда инфекционное заболевание вызвано резистентными бактериями, простая смена антибиотиков окажется дорогостоящей и бессмысленной затеей, поскольку всего лишь отложит проблему на неопределенный срок.

При лечении резистентных инфекций ветеринарные врачи должны придерживаться последовательного и разумного подхода.

Сначала следует установить, чем вызвано отсутствие реакции на препараты — то ли это действительно резистентность, то ли какие-то другие факторы.

Следует помнить, что тестирование на чувствительность к антибиотикам исходит из предположения о том, что концентрация препарата в плазме крови должна примерно соответствовать концентрации его в тканевой жидкости, и не учитывает побочные факторы, которые могут оказаться главной причиной неудачного лечения.

Культивирование бактерий

При первом же удобном случае следует провести культивирование и выделить бактерий, вызвавших данную инфекцию.

Затем следует провести лабораторное тестирование на чувствительность к антибактериальным препаратам.

Допустимо использовать и «домашние» методы, однако их строгость и точность может не соответствовать тем требованиям, которые предъявляются к методам выявления устойчивых бактерий.

Следует ли непременно избавляться от резистентных бактерий?

Существует различие между колонизацией и инфекцией. Культура устойчивых бактерий может быть получена из наконечника катетера, эндотрахеальной трубки, мазка ткани или жидкости. Во многих случаях культура бактерии представляет локальную колонию, а не серьезную инфекцию. То, что культура бактерии была получена из эндотрахеальной трубки, еще не означает, что у животного пневмония.

Решение подвергнуть животное лечению сильнодействующими и потенциально токсичными антибиотиками должно приниматься после тщательного размышления. Хорошее клиническое чутье и практический опыт являются залогом успеха ветеринарного врача в определении значения полученной культуры.

Лечение

После культивирования бактерии следует определить, какой препарат окажется наиболее эффективным.

В некоторых случаях можно использовать такие фторхинолоны, как энрофлоксацин, дифлоксацин или орбифлоксацин, однако возможна высокая степень резистентности к этим препаратам.

Культивирование бактерий следует проводить с определением чувствительности к имипенему, а также второму (например, цефокситин) и третьему (цефотаксим) поколению цефалоспоринов, поскольку во многих случаях только эти препараты могут оказаться эффективными.

Существует несколько синтезируемых этими бактериями бета-лактамаз широкого спектра, которые способны инактивировать препараты первого и третьего поколения цефалоспоринов, однако оказываются бессильными перед препаратами второго поколения или имипенемом. Таким образом, исследования на чувствительность обеспечивают полный спектр возможного выбора лекарственных препаратов.

Поскольку большинство цефалоспоринов первого и третьего поколения, не говоря уже о карбапенемах, вводят только парентерально, постольку пероральное введение препаратов допустимо лишь в тех случаях, когда животных приходится лечить в домашних условиях. Цефиксим (Супракс) является одним из двух цефалоспоринов третьего поколения, допускающих пероральное назначение. Продается в виде жидкой суспензии и таблеток и назначается собакам в дозе 10 мг/кг каждые 12 часов.

Меры борьбы с резистентностью бактерий

Мы не в состоянии предотвратить возникновение устойчивости у бактерий, однако можем использовать антибактериальные препараты, чтобы свести этот процесс к минимуму.

Антибактериальные препараты следует назначать в довольно высоких дозах, тщательно избегая их неправильного их сочетания.

Привычного использования широкого спектра цефалоспоринов и карбапенемов (например, имипенема) следует избегать, поскольку эти препараты способны вызвать бета-лактамазно-медиаторную устойчивость.

Если назначены профилактические антибиотики, то они должны вводиться лишь перед самой операцией и никак не раньше.

В одном исследовании было показано, что когда цефазолин назначают задолго до операции, то постоперационные инфекции могут выработать очень большую устойчивость по отношению к этому препарату.

Антибиотики не следует применять дольше 24 часов после операции, если она прошла без каких-либо осложнений или инфицирования.

Чтобы предотвратить распространение резистентных бактерий, в ветеринарных клиниках предпринимаются специальные меры предосторожности. Животные, уже зараженные устойчивыми инфекциями, изолируются.

Кроме того, историю их болезни и клетку, в которой они содержатся, помечают специальной меткой, чтобы персонал относился к этим пациентам с повышенной осторожностью, а после выписки подверг их клетки тщательной дезинфекции.

При проведении обычного курса терапии инфицированных резистентными бактериями животных рекомендуется лечить в последнюю очередь, чтобы не заразить остальных.

Персонал следует проинструктировать на предмет пользования одноразовыми перчатками и тщательного соблюдения всех мер гигиены во время уборки за этими пациентами. Ну и наконец, время пребывания таких животных в клинике следует максимально сократить.

  • Анализ крови у кошкиПрактически все инфекционные и инвазивные заболевания кошек диагностируют при помощи…
  • Атопика для собакПоказания Атопика для собак показан для лечения атопического дерматита у собак…

Источник: http://vetsova.ru/rezistentnost-bakteriy-k-antibiotikam-v-veterinarii/

Бактериологический анализ СКРИНИНГ, с подтитровкой к антибиотикам

Подтитровка на антибиотики

Бактериологический анализ с выделением возбудителя и определением чувствительности возбудителя к антибиотикам Основные правила: Материал необходимо брать непосредственно из очага поражений.При взятии материала необходимо соблюдать правила личной безопасности и асептику.

Обеспечение условий, исключающих контаминацию их за счет смежных областей кожи, других органов и т. д.Брать материал необходимо до начала антибактериальной терапииМатериал следует брать в период наибольшего содержания в нем возбудителя заболевания, например кровь для выделения гемокультуры – в период лихорадки, гипотермии, лейкоцитоза.

Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования.Время между взятием материала и его исследованием должно быть максимально коротким  Материал, подлежащий бак.исследованию, собирают в специализированные контейнеры, поставляемые лабораторией.

Выделяемые возбудители: Отделяемое верхних дыхательных путей:  Основные возбудители заболеваний – условно-патогенные микроорганизмы: бактерии рода Streptococcus., Staphylococcus, реже грамотрицательные микрорганизмы сем-ва Enterobacteriaceae. Нормальная микрофлора: Streptococcus viridans group, не патогенные дифтероиды (Corynebacterium sp., ).

Мокрота, трахеобронхиальные смывы: бактерии рода Streptococcus., Staphylococcus (включая MRSA), неферментирующие грамотрицательные бактерии, грамотрицательные бактерии сем-ва Enterobacteriaceae. Отделяемое уха: грамотрицательные бактерии сем-ва Enterobacteriaceae., бактерии рода Streptococcus (S. pyogenes, S.canis, S. pneumoniae, S.

viridans и др), неферментирующие грамотрицательные бактерии (Pseudomonas aeruginosa и др), коринеформные бактериии (Corynebacterium sp.).Отделяемое глаза: Бактерии рода Staphylococcus (S. intermedius, S. aureus, S. epidermidis и др), бактерии рода Streptococcus (S. pyogenes, S.canis, S. pneumoniae, S.viridans и др), Moraxella sp.

, неферментирующие грамотрицательные бактерии (Pseudomonas aeruginosa и др), коринеформные бактериии (Corynebacterium sp.)., грамотрицательные бактерии сем-ва Enterobacteriaceae. (E.coli, Proteus mirabillis и др).Отделяемое половых органов: Выделяемые возбудители условно-патогенные бактерии-  грамотрицательные бактерии сем-ва Enterobacteriaceae.

, неферментирующие грамотрицательные бактерии,  бактерии рода Streptococcus, Staphylococcus, Enterococcus, коринеформные бактерии.Раневое отделяемое и тканей: бактерии рода Streptococcus (S.canis, S. pyogenes и др. гемолитические стрептококки гр B, C, G), бактерии рода Staphylococcus ( S.aureus, S.intermedius, S. epidermidis и др), Enterococcus sp.

, грамотрицательные бактерии сем-ва Enterobacteriaceae. , неферментирующие грамотрицательные бактерии, , Pasteurella multocida, E, rhusiopathiae. Желчь: грамотрицательные бактерии сем-ва Enterobacteriaceae. (E.coli, Klebsiella sp., Enterobacter sp., Proteus sp., (искл. Salmonella sp., – определено в отдельное исследование)., Staphylococcus sp.

, Enterococcus faecalis, неферментирующие грамотрицательные бактерии (Pseudomonas aeruginosa и др).Ректальный мазок: Условно – патогенные микроорганизмы (УПМО) – Бактерии сем-ва Enterobacteriacea (искл. Salmonella sp. – определен отдельный код исследования ),, не ферментирующие грамотрицательные микроорганизмы, бактерии рода Staphylococcus, Enterococcus

Взятие

Бактериологическое исследование кожных покровов: Материал, отобранный при глубоком соскобе с кожи (с кровью, подобно соскобу на демодекоз), помещают в пробирку с транспортной средой (синяя крышка). Бактериологическое исследование органов дыхания: Мазки в транспортную среду из носа, носоглотки и зева с помощью ватных тампонов. Материал забирают натощак.

При отсутствии секрета их можно смочить 0,9% NaCl. При заборе материала из зева нельзя прикасаться тампоном к слизистой оболочке полости рта и языка. Ротовая полость: Материал отбирают ватным тампоном: поверхность слизистой оболочки щек, десен и языка. При наличии налета или язв из них мазки желательно отбирать отдельным тампоном.

Рвотные массы и промывные воды желудка: Рвотные массы доставляют в лабораторию на льду; при невозможности немедленного начала анализа их можно заморозить. Кал на бак исследование (качественное исследование на выделение патогенных микроорганизмов): в стерильных контейнерах для кала. При взятии из прямой кишки тампон вводят на глубину 8-10 см.

Моча: обмыть наружные половые органы с мылом. Только утренняя моча. Средняя струя (10-20 мл) в стерильный контейнер для мочи. При невозможности мочеиспускания – пункция мочевого пузыря. Мочеиспускательный канал: утром, до мочеиспускания, образец берут стерильной петлей. Влагалище: из верхней трети и заднего свода влагалища тампоном или пипеткой.

Гной, пунктаты органов, экссудат: с помощью стерильного шприца или ватного (марлевого) тампона, помещают в транспортную среду


Значение

В ходе исследования устанавливается наличие или отсутствие бактерий аэробов и факультативных анаэробов в исследуемом материале.

При наличии в материале не патогенных, условно – патогенных, либо патогенных бактерий проводится их идентификация (установление родовой, видовой (если это возможно) принадлежности), дается полуколичественная оценка их содержания в материале, определяется чувствительность выделенного микроорганизма к антибактериальным препаратам.

Чувствительность выделенных бактерий определяется к следующему списку препаратов: Оксациллин 10 мкг, Цефотаксим (клафоран, тарцефоксим) 30мкг, Гентамицин (герамицин, генцин) 10мкг, Доксициклин (вибрамицин, доксилан, довицин)30мкг, Левомицетин(хлорамфеникол) 30мкг, Линкомицин (линкоцин, нелорен) 15мкг, Имипенем (тиенам, примаксин)10мкг, Меропенем (меронем) 10мкг, Офлоксацин (таривид, заноцин) 10мкг, Цефтазидим (фортум, тазицеф) 30мкг, Ципрофлоксацин (ципробай, ципролет) 5 мкг, Ампициллин (ампицид, амплитал, росциллин) 10мкг, Амоксициллин (кламоксил, амоксил, флемоксин) 20мкг, Амоксициллин – клавунат (синулокс, амоксиклав, аугментин)20/10мкг, Рифампицин (бенемицин, рифадин, тубоцин) 5мкг, Цефуроксим (аксетин, кетоцеф)30мкг, Цефазолин (кефзол, анцеф, цефаприм, прозолин) 30мкг, Цефалексин (оспексин, пролексин, цефаклен) 30мкг, Левофлоксацин (таваник) 5 мкг, Цефтриаксон 30мкг, Энрофлоксацин (байтрил, энрофлон, карифлокс, энроксил, энрофлокс, энробиофлокс) 10мкг

aМазок в пробирку со средой Кери-Блера

bМазок в пробирку со средой Эймса (Стюарта)

eСмывы со слизистых в пробирку Эппендорфа (с физраствором 0.5 мл)

fКал в контейнере с ложечкой

gСодержимое желудка 10-30 мл

iКровь 2-3 мл. на фильтр-бумаге, высушенная для генетических исследований

kОбразцы тканей не более 2х2 см в контейнере с 10% раствором формалина

lМатериал берется только в лаборатории!

nМолоко в контейнере 10-30 мл

pКровь в пробирку с К3ЭДТА (К2ЭДТА)

sКровь в пробирку для получения сыворотки/сыворотка

tКлещ (не > 2 шт.), плотно закрытая сухая пробирка типа Эппендорф

uМоча во флаконе 3 – 10 мл

vВыпоты или биологические жидкости в контейнере или в шприце

wВолос (шерсть) в пробирке Эппендорфа

xСмывы буккального эпителия

zБиопсийный эндоскопический материал в 10% растворе формалина. До 10 фрагментов с одной локации.

rРектальный смыв в пробирку Эппендорфа (с физрастворм 0,5 мл)

оМазок-отпечаток на стекло

c Паренхиматозные органы в герметичном пакете

hКровь в пробирку для определения гемостаза (цитрат Na 3,8%)

jЭякулят в стерильном контейнере

qБронхо-альвеолярный лаваж в контейнере или шприце (5-10 мл)

yБиоптат слизистой желудка в пробирку Эппендорфа (с физраствором 0.5 мл)

смотри специальные условия на сайте

Источник: https://vetlab.ru/catalog/mikrobiologiya/bakteriologicheskiy_analiz_skrining_s_podtitrovkoy_k_antibiotikam/

Антибиотики

Подтитровка на антибиотики

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам и бактериофагам

Культуральное бактериологическое исследование (посев на питательные среды,  бак.посев) позволяет получить непосредственно культуру микроорганизма – возбудителя данной инфекции.

Выделив культуру, ее можно во-первых точно идентифицировать (определить вид микроба), а во-вторых определить ее чувствительность к лекарственным препаратам – антибиотикам (антибактериальным препаратам) и бактериофагам.

Этот тест (определение антибиотикочувствительности, «подтитровка антибиотиков» ) имеет важнейшее значение для последующего лечения, т.к. позволяет выбрать препарат, максимально подходящий для лечения конкретного возбудителя.

Необходимость такого анализа связана с тем, что даже бактерии одного вида, но выделенные от разных животных (разные штаммы) могут отличаться по спектру чувствительности.

Сегодня выпускаются десятки наименований антибиотиков (АБ), относящиеся по своему строению к различным группам. Например, для лечения стафилококка могут применяться препараты как минимум девяти фармакологических групп, каждая из которых включает несколько наименований.

Выбрать из них оптимальный для лечения конкретного возбудителя – непростая задача, решить которую невозможно без определения антибиотикочувствительности.

Характерная особенность современных возбудителей – частая встречаемость высокоустойчивых (мультирезистентных) штаммов микроорганизмов. Они проявляют устойчивость к действию различных групп антибиотиков – одной или сразу нескольких.

Например, грамотрицательные бактерии семейства Enterobacteriaceae (к ним относятся такие распространенные возбудители как Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa) образуют ферменты БЛРС – беталактамазы расширенного спектра.

Эти ферменты нейтрализуют действие бета-лактамных антибиотиков (пенициллинов и цефалоспоринов). У штаммов стафилококков также существует механизм резистентности, маркерным признаком которого является устойчивость к метициллину.

МРС – метициллинрезистентные стафилококки – проявляют устойчивость ко всем бета-лактамным антибиотикам. Среди энтерококков растет количество полирезистентных штаммов, устойчивых в том числе и к ванкомицину (препарату выбора).

В ходе бактериологического исследования в компетентных лабораториях у микроорганизмов проводят определение указанных маркеров резистентности, и дают результаты в заключении.

Это дает информацию лечащему врачу, антибиотики каких групп будут эффективны, какие будут бесполезны.

В лабораторной практике нередки случаи, когда возбудитель устойчив почти ко всем протестированным антибиотикам, за исключением 1-2 препаратов.

Определение чувствительности к антибиотикам обычно проводят диско-диффузионным методом, используя стандартизованные питательные среды и стандартизованные диски с антибиотиками.

Используют как минимум два набора антибиотиков – один для грамположительных (Гр+), другой для грамотрицательных (Гр-) микроорганизмов (что соблюдается увы не во всех лабораториях).

Также наборы антибиотиков несколько отличаются в зависимости от источника происхождения – например, для культур из мочи обычно ставят дополнительно несколько препаратов-«уросептиков».

Если от животного выделено несколько культур микроорганизмов, чувствительность к АБ определяется индивидуально к каждой из них. Результаты лаборатория выдает по общепринятой градации: «Ч» — культура чувствительна к антибиотику; «П» — промежуточный уровень чувствительности; «У» — культура устойчива.

Также целесообразно определение чувствительности к бактериофагам – препаратам вирусной природы, имеющим ряд преимуществ по сравнению с антибиотиками, хорошо себя зарекомендовавшим в гуманной медицине. Существуют моновалентные и поливалентные бактериофаги.

В лабораториях обычно определяют чувствительность к трем бактериофагам – одному моновалентному (специфичному для конкретного возбудителя) и двум поливалентным, включающим комплекс фагов против нескольких видов бактерий. Без лабораторного определения чувствительность возбудителя к бактериофагам практически непредсказуема.

Фаг может «работать» очень хорошо, а может быть вообще не активным против данной культуры микроба.

Итак, по результатам лабораторного бактериологического исследования врач получает на руки информацию, необходимую для эффективного лечения конкретной инфекции. Традиционный подход (сначала лечим тем, что есть, потом диагностируем) постепенно уходит из практики.

Препараты широкого спектра, на которые привыкли надеяться лечащие врачи, все чаще дают сбои, в силу распространения высокоустойчивых штаммов.

Кроме того, лечение животного неспецифическим антибиотиком ведет к тому, что нормальная микрофлора организма сильно страдает, а патогенная флора адаптируется к антибиотикам, приобретает устойчивость, и вылечить такое животное в дальнейшем будет крайне сложно.

Очевидно что в экстренных случаях, при критических состояниях у врача нет времени дожидаться результатов анализов. Однако в остальных случаях потраченное на анализ время окупится гораздо быстрее, чем длительное лечение неэффективным препаратом.

Определение чувствительности грибов к противогрибковым препаратам (антимикотикам) также проводится в некоторых диагностических бак.лабораториях и имеет свои особенности, о чем Вы можете прочитать в соответствующем разделе сайта БакПосев-Вет.Ру.

Источник: www.bakposev-vet.ru

Источник: http://bakposev-vet.ru/antibiotiki/

Прежде чем начать принимать антибиотик, проверь, поможет ли он тебе

Подтитровка на антибиотики

Индивидуальный подбор эффективного антибиотика – залог победы над инфекцией

При инфекционных заболеваниях очень важно установить, к какому конкретно антибиотику чувствителен данный возбудитель, от этого зависит эффективность лечения.

Особенно это актуально в наши дни, когда многие возбудители проявляют резистентность (устойчивость) ко многим антибиотикам.

Бактериологическое исследование (посев на питательные среды,  бакпосев) позволяет получить непосредственно культуру микроорганизма – возбудителя данной инфекции.

Выделив культуру, ее можно во-первых точно идентифицировать (определить вид микроба), а во-вторых определить ее чувствительность к лекарственным препаратам – антибиотикам и бактериофагам.

Этот тест (определение антибиотикочувствительности, «подтитровка антибиотиков» ) имеет важнейшее значение для последующего лечения, т.к. позволяет выбрать препарат, максимально подходящий для лечения конкретного возбудителя. Необходимость такого анализа связана с тем, что даже бактерии одного вида, но выделенные от разных людей,  могут отличаться по спектру чувствительности.

Сегодня выпускаются десятки наименований антибиотиков, относящиеся по своему строению к различным группам. Выбрать из них оптимальный для лечения конкретного возбудителя – непростая задача, решить которую невозможно без лабораторного определения антибиотикочувствительности. Это касается всех инфекций – начиная от угрей и фурункулов и заканчивая инфекциями внутренних органов.

Характерная особенность современных возбудителей – частая встречаемость высокоустойчивых штаммов микроорганизмов. Например, бактерии семейства Enterobacteriaceae (к ним относятся такие распространенные возбудители как Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae) образуют ферменты БЛРС – беталактамазы расширенного спектра.

Эти ферменты нейтрализуют действие бета-лактамных антибиотиков (пенициллинов и цефалоспоринов).

Устойчивость к антибиотикам сейчас повышается практически у всех возбудителей – стафилококков, энтерококков, стрептококков, синегнойной палочки и многих других.

Что особенно тревожно – устойчивость может развиваться сразу к нескольким типам (классам) антибиотиков, такие возбудители называются полирезистентные.

Хотя арсенал антибиотиков, казалось бы, широк, подобрать «работающий» препарат врачам становится всё сложней.  Именно поэтому определение антибиотикограммы становится необходимым исследованием для лечения инфекций.

В ходе бактериологического исследования в компетентных лабораториях проводят сначала выделение возбудителей из клинического материала, а затем у каждого из них определяют чувствительность к набору антибиотиков. Это дает информацию лечащему врачу, какие  антибиотики будут эффективны, какие будут бесполезны в данном конкретном случае.

В лабораторной практике нередки случаи, когда возбудитель устойчив почти ко всем протестированным антибиотикам, за исключением 1-2 препаратов. Потраченные на анализ время и деньги окупятся гораздо быстрее, чем длительное лечение неэффективным лекарством.

Традиционный подход (сначала назначаем лечение, потом диагностируем) постепенно уходит из практики. Препараты широкого спектра, на которые привыкли надеяться лечащие врачи, все чаще дают сбои, в силу распространения высокоустойчивых штаммов.

Кроме того, лечение неэффективным антибиотиком ведет к тому, что нормальная микрофлора организма сильно страдает, а патогенная флора адаптируется к антибиотикам, приобретает устойчивость, и вылечить такую инфекцию в дальнейшем будет крайне сложно.

Самолечение антибиотиками без определения антибиотикограммы ведет к «наработке» в организме штаммов с повышенной устойчивостью, которые впоследствии могут вызвать еще более серьезное заболевание. И лечить его будет гораздо сложнее. 

Также целесообразно определение чувствительности возбудителей к бактериофагам – препаратам вирусной природы, имеющим ряд преимуществ по сравнению с антибиотиками и хорошо себя зарекомендовавшим при лечении ряда заболеваний.

Однако разные микробы по-разному восприимчивы к бактериофагам, которые также выпускаются в различных вариантах. Здесь опять на помощь приходит бактериологическое исследование, однако не все лаборатории определяют чувствительность к бактериофагам.

Определение чувствительности к антибиотикам и бактериофагам рекомендуем Вам провести в диагностическом центре «Финист».

Причем это входит в стандартное бактериологическое исследование (бакпосев), доплачивать дополнительно ничего не придется.

В «Финисте» можно провести бакпосев практически любого биоматериала (мазки с кожи и слизистых, урогенитальные образцы, моча, кал на дисбактериоз и т.д.). Все выделенные из материала возбудители будут происследованы на чувствительность к антибиотикам и бактериофагам.

Бактериологическое исследование в «Финисте» помогает нашим пациентам точно диагностировать возбудителя инфекции, и индивидуально определять наиболее эффективный препарат для лечения.

Все исследования проводятся высокопрофессиональными микробиологами с многолетним стажем лабораторных исследований.

Необходима консультация специалиста. Проконсультироваться с врачом Вы можете, обратившись в диагностический центр «Финист».

Источник: https://www.finistmedanaliz.ru/state/105-priem-antibiotika.html

Анализ на чувствительность к антибиотикам: суть, как сдавать, расшифровка

Подтитровка на антибиотики

Анализ на чувствительность к антибиотикам является обязательным при возникновении у врача подозрений, что заболевание пациента имеет бактериальную природу. Это связано с тем, что медики пытаются контролировать назначение данных препаратов, чтобы не стимулировать мутации и не вызывать резистентность у микроорганизмов.

Определение

Анализ на чувствительность к антибиотикам – это лабораторный способ выявления препарата, который будет оказывать наибольшее действие на патогенную флору в данном конкретном случае болезни.

На данный момент антибактериальная терапия применяется достаточно широко там, где она нужна, а также в тех случаях, когда это совсем не обязательно, для перестраховки от возможных осложнений. Например, после кесарева сечения, лапароскопических операций, удаления конкрементов из почек или мочеточников и т. д.

Фармацевтическая промышленность может предложить широкий выбор препаратов как в плане цены, так и в плане действенности. Для того чтобы не «тыкать пальцем в небо» и назначить эффективный антибиотик, нужно провести посевы на чувствительность.

Показания

Перед тем как врач подберет терапию, пациенту необходимо сдать некоторые анализы.

Посев на чувствительность к антибиотикам назначается, если необходимо определить лекарство, которое в данном случае будет наиболее уместно.

Чаще всего это исследование назначается для лечения заболеваний, передающихся половым путем, или ЗППП. Для детей же необходимость в определении антибиотика – это обязательное условие.

Кроме того, определение чувствительности нужно, чтобы избежать устойчивости бактерий к лечению. Если пациента недавно лечили антибиотиками, и теперь вновь необходим повторный курс, то требуется замена препарата. Это позволит использовать меньшие дозы лекарства и не вызывать мутации у возбудителя. В гнойных хирургических отделениях антибиотики меняют каждые два-три месяца.

Данный анализ необходим еще в том случае, если на основную группу антибиотиков у больного возникает аллергическая реакция.

Диффузионные методы

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам, и не только ее, можно провести несколькими способами. Первый из них – это метод дисков. Проводят его следующим образом. В чашку Петри заливают агар, а когда он застынет, специальным инструментом наносят исследуемый материал.

Затем по поверхности агара раскладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После чашку закрывают и ставят в термостат. Постепенно диск погружается в желатин, а антибиотик диффундирует в окружающее пространство. Вокруг бумаги образуется зона «подавления роста».

Чашки проводят в термостате двенадцать часов, затем их вынимают и измеряют диаметр вышеуказанной зоны.

Второй способ – это метод Е-теста. Он похож на предыдущий, но вместо бумажных дисков используют полоску, которая на своем протяжении в разной степени пропитана антибиотиком.

После двенадцати часов экспозиции в термостате чашку Петри достают и смотрят, в каком месте зона подавления роста соприкасается с полоской бумаги.

Это будет наименьшая концентрация препарата, которая необходима для лечения заболевания.

Достоинством этих тестов является быстрота и простота их проведения.

Методы разведения

Анализ на флору и чувствительность к антибиотикам можно провести и другим способом. Этот метод основан на последовательном уменьшении концентрации антибиотика (от максимальной до минимальной) с целью определить, в какой из пробирок прекратится сдерживание роста бактерий.

Сначала подготавливают растворы препарата. Затем их вносят в жидкую среду с бактериями (бульон или агар). Все пробирки на ночь (то есть 12 часов) помещаются в термостат при температуре 37 градусов, а утром проводят анализ получившихся результатов.

Если содержимое пробирки или чашки Петри мутное, это свидетельствует о росте бактерий и, следовательно, неэффективности антибиотика в данной концентрации.

Первая пробирка, в которой визуально не будет определяться рост колоний микроорганизмов, будет считаться достаточной концентрацией для лечения.

Это разведение препарата принято называть минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Она измеряется в миллиграммах на литр или микрограммах на миллилитр.

Интерпретация результатов

Анализ на чувствительность к антибиотикам нужно уметь не только правильно сделать, но и грамотно расшифровать. Основываясь на получаемых результатах, все микроорганизмы делят на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Для того чтобы различать их между собой, используются условные пограничные концентрации препаратов.

Эти значения не являются постоянными и могут изменяться в зависимости от приспосабливаемости микроорганизмов. Разработкой и пересмотром этих критериев поручено заниматься химиотерапевтам и микробиологам.

Одной из официальных структур такого рода является Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США.

Разработанные ими стандарты признаны во всем мире для использования в оценке активности антибиотиков, в том числе для рандоминизированных многоцентровых исследований.

Различают два подхода к оценке результатов анализа на чувствительность к антибиотикам: клинический и микробиологический. Микробиологическая оценка ориентируется на распределение эффективных концентраций антибиотика, а клиническая – на качество антибактериальной терапии.

Резистентные и чувствительные микроорганизмы

Анализ – определение чувствительности антибиотикам – назначается с целью выявить чувствительные и устойчивые микроорганизмы.

Чувствительными называются возбудители, которые поддаются лечению антибиотиками в средней терапевтической концентрации.

Если достоверная информация о категории чувствительности микроорганизма отсутствует, то учитываются данные, полученные в условиях лаборатории.

Они совмещаются со знаниями о фармакокинетике используемого препарата, и после синтеза данной информации делается вывод о восприимчивости бактерий к лекарству.

К резистентным, то есть устойчивым, микроорганизмам относятся те бактерии, которые продолжают вызывать заболевания даже при использовании максимальных концентраций лекарственных веществ.

Промежуточную резистентность устанавливают в том случае, если заболевание в процессе лечения может иметь несколько исходов. Выздоровление пациента возможно в случае использования высоких доз антибиотиков либо в случае прицельного накапливания лекарства в месте инфекции.

Минимальная бактерицидная концентрация

Анализ на микрофлору и чувствительность к антибиотикам определяет такой показатель, как минимальная бактерицидная концентрация, или МБК. Это самая низкая концентрация препарата, которая в лабораторных условиях вызывает элиминацию практически всех микроорганизмов в течение двенадцати часов.

Знание этого показателя врачи используют, когда назначают терапию не бактерицидными, а бактериостатическими лекарственными средствами. Или в случаях, когда стандартная антибактериальная терапия оказывается неэффективной. Чаще всего этот анализ заказывают для больных с бактериальным эндокардитом, остеомиелитом, а также при оппортунистических инфекциях.

Что может быть образцом?

Анализ на чувствительность к антибиотикам может проводиться с использованием биологических жидкостей:

– слюна;

– кровь;

– моча;

– сперма;

– грудное молоко.

Кроме того, для определения местной чувствительности производят забор мазков из уретры, цервикального канала и верхних дыхательных путей.

Подготовка к анализам

Бак. анализ на чувствительность к антибиотикам не требует от пациентов существенной подготовки, но некоторые ограничения все-таки есть.

  1. Для исследования используется средняя порция утренней мочи, которая собирается в стерильную посуду. Перед этим пациент обязательно должен осуществить туалет наружных половых органов и рук.
  2. Грудное молоко собирается перед кормлением ребенка. Первая порция сливается, а затем в стерильный контейнер сцеживается несколько миллилитров с каждой груди.
  3. Перед сдачей мазка из носоглотки стоит воздержаться от приема пищи в течение пяти-шести часов.
  4. В случае взятия мазка из половых путей, рекомендуют воздерживаться от половых контактов в течение пары дней.

На сегодняшний день не существует клинических или лабораторных методов, которые бы со стопроцентной вероятностью могли предсказать эффект от антибактериальной терапии. Но в то же время определение чувствительности бактерий к лекарственным веществам может быть ориентиром для врачей в вопросах выбора и коррекции лечения.

Источник: https://FB.ru/article/278441/analiz-na-chuvstvitelnost-k-antibiotikam-sut-kak-sdavat-rasshifrovka

Вопросы борьбы с антибиотикорезистентными микроорганизмами на птицефабриках РФ

Подтитровка на антибиотики

Инфекционные заболевания и заболевания, связанные с бактериями, являются причиной довольно значительной части смертей сельскохозяйственных птиц и животных. Некоторые из бактерий патогенны и для человека, их присутствие в продуктах питания может представлять опасность для его здоровья, а иногда – и жизни.

К актуальным для нашей страны возбудителям бактериальных инфекций птиц можно отнести Y. enterocolitica, Salmonella enterica, Avibacterium spp., Pasteurella spp., Listeria monocitogenes, Gallibacterium anatis, Lactobacillus salivarius (патогенные формы), Enterococcus cecorum, E.coli, Mycoplasma spp.

, Pseudomonas aeruginosa, Clostridium perfringens и многие другие [2, 5, 7]. Следует отметить, что большая часть перечисленных микроорганизмов не культивируется в лабораториях птицефабрик.

Выделение и подтитровка на антибиотики культур кишечной палочки или стафилококков никак не могут заменить изоляцию всего многообразия этиологических агентов бактериальных инфекций.

С одной стороны, использование антибиотиков в животноводстве повышает риск попадания антибиотикоустойчивых микроорганизмов в организм человека с продуктами питания, а с другой – встает вопрос, не приведет ли ограничение потребления антибиотиков в животноводстве к росту заражения людей патогенными бактериями и повышению вероятности появления антибиотикоустойчивых штаммов. В этом случае возрастет потребление антибиотиков населением.

Из нашего опыта следует, что работа бактериологических лабораторий птицефабрик порой приносит больше вреда, чем пользы. Выделение не основной причины гибели птицы, а наиболее легко культивируемых микроорганизмов дезориентирует врача и приводит к назначению неактуальных антибиотиков.

Кроме того, многие бактерии могут быть выделены только от живой птицы, и доставка проб биоматериала в посторонние лаборатории часто сопровождается гибелью притязательных микроорганизмов (пастерелл, возбудителей гемофилеза и орнитобактериоза).

Из данных наблюдений вытекают два вывода:

  1. наиболее надежным критерием эффективности антибиотика является мониторинг результатов его применения на птицефабрике.
  2. на крупных птицефабриках лабораторно-диагностические лаборатории необходимо развивать до общемирового уровня и включать в выполняемые ими функции элементы научно-исследовательской работы.

Проблема развития антибиотикорезистентности по-прежнему стоит остро: мы регулярно выделяем полирезистентные, т. е. устойчивые к широкому спектру антибиотиков культуры E. coli и Salmonella spp., и ряду птицефабрик уже нельзя предложить антибиотик, обладающий достаточной активностью в отношении сальмонелл или кишечной палочки. Решение данной проблемы следует разбить на две части:

  1. профилактика возникновения антибиотикорезистентности и минимизация рисков распространения антибиотикорезистентных микроорганизмов включая их попадание в продукты птицеводства;
  2. терапия и профилактика заболеваний, вызванных антибиотикорезистентными бактериями.

Наибольший риск развития антибиотикорезистентности обеспечивает повторное применение антибактериального препарата одной группы в пределах одного тура в одном и том же птичнике. Вторым по значимости фактором является использование комплексных антибиотиков (нередко это провоцирует бактериальные клетки вырабатывать столь же «комплексный» ответ, например эффлюкс).

Необоснованное применение антибиотиков и низкая их эффективность – повод для увеличения курсовых доз и кратности курсов лечения, а это, в свою очередь, ускоряет формирование устойчивых штаммов бактерий.

Мероприятия санитарного характера и биозащита предприятия – мощный фактор профилактики антибиотикорезистентности.

Однако следует учитывать, что уничтожение устойчивых к антибиотикам микроорганизмов путем дезинфекции может быть недостаточным, важно разрушить и генетический материал, потенциально содержащий гены антибиотикорезистентности. К наиболее эффективным дезинфектантам, разрушающим ДНК, можно отнести персульфаты (Экоцид) (рис.

1.), хлорсодержащие антисептики и кислоты. Альдегиды, гуанидины и четвертичные аммонийные соединения не способны подавлять горизонтальный перенос генетических факторов устойчивости к антибиотикам [3].

Рис. 1. Подавление устойчивости к ампициллину путем разрушения плазмид с геном лактамазы. Результаты трансформации плазмиды pBlueskript, подвергнутой воздействию препаратов Экоцид (1) и HPPI (2), культуры E.coli XL Blue

На протяжении последних лет в секторе молекулярной биологии СФНЦА РАН часто выделяются культуры кишечной палочки и сальмонелл, устойчивые к широкому спектру антибиотиков (фторхинолонам, лактамам, аминогликозидам) именно на птицефабриках, предпринявших попытку тотального отказа от данных препаратов. Резистентность к антибиотикам у этих микроорганизмов реализуется с помощью эффлюкса – системы активного выброса токсичных ксенобиотиков (рис. 2, 3), к которым относятся и многие антибиотики (энрофлоксацин, гентамицин, хлорамфеникол, флорфеникол и др.).

Для активного выброса используется система насосов, запускаемых с использованием сложной системы регуляции в ответ на оксидативный стресс, действие некоторых дезинфектантов и положительно заряженных молекул.

Так, например, микотоксин цитринин, продуцируемый микроскопическими грибами родов Penicillium и Aspergillus, обладает антибактериальной активностью, вызывает дисбиоз кишечника и, в отличие от антибиотиков, попадает в организм с кормом ежедневно.

Наши исследования показали наличие активации эффлюкса у сальмонелл под действием цитринина.

Таким образом, качество кормов может оказаться даже более значимым фактором, влияющим на устойчивость микробиоты птиц к антибактериальным препаратам, так как нередко птицы потребляют микотоксины непрерывно и в существенно больших концентрациях, чем антибиотики.

Рис. 2. Схема эффлюкс-помпы

Рис. 3. Оценка эффлюкса у культур сальмонелл в тесте с бромистым этидием

Что касается терапии и профилактики заболеваний, вызванных антибиотикорезистентными бактериями, картина здесь следующая.

Во-первых, далеко не всегда мы видим корреляцию результатов подтитровки на антибиотики и клинической эффективностью последних.

Размеры отечественных птицефабрик велики, уровень биозащиты и высокая культура производства способствуют ограничению спектра возбудителей бактериальных инфекций.

Именно поэтому результаты ограниченных экспериментов с лекарственными препаратами можно смело экстраполировать на птичники.

Во-вторых, механизмы действия многих антибиотиков до конца еще не изучены [4]. Например, некоторые антибиотики способны активировать лизогенные бактериофаги (многие бактериальные клетки содержат в своем составе неактивные бактериофаги в виде профагов).

Как следует из наших исследований, наиболее часто наблюдается активизация бактериофагов под действием сульфаниламидных антибиотиков, доксициклина, флорфеникола [4]. Возможно, необъяснимо высокая клиническая эффективность сульфаниламидных препаратов обусловлена именно этим фактором.

В итоге представляется перспективным использовать препараты бактериофагов в качестве дополнительного фактора для борьбы с антибиотикорезистентными формами бактерий [6].

Высокую клиническую эффективность показали челночные схемы антибиотикотерапии. Например, 2–3 дня квестигин и 2–3 дня гентамицин или 3 дня флорон и 2 дня гиракса.

Преимуществом таких схем является дополнительное подавление вторым антибиотиком бактерий, приобретших устойчивость к первому. При терапии кишечных инфекций нередко развивается постантибиотический дисбиоз.

В такой ситуации дополнительное введение колистина обеспечивает пребиотический эффект и минимизирует риски реинфекции.

В подавляющем большинстве случаев массовые бактериальные инфекции развиваются на фоне инфекций вирусных. Из наших наблюдений следует, что разные вирусные агенты провоцируют разные вторичные бактериальные инфекции.

Например, метапневмовирусная инфекция часто влечет за собой орнитобактериозы и пастереллезы. Эшерихиозы чаще возникают на фоне всплеска ИБК, ИЛТ, болезни Гамборо и НБ.

Флавивирусная инфекция кур обычно провоцирует иерсиниозы [1].

Синдром везикулярного энтерита резко повышает риск развития кормовых бактериальных токсикоинфекций, энтерококковых инфекций и бактериального эндокардита, ассоциируемого с L. salivarius [7].

Наблюдаемый последние два года парвовирусный энтерит цыплят обычно ассоциируется с широким спектром вторичных бактериальных инфекций, плохо поддающихся антибиотикотерапии.

Как правило, противодействие первичным вирусным инфекциям позволяет добиться лучшего клинического эффекта.

Однако птицефабрики с высоким уровнем сохранности часто отличаются от птицефабрик с меньшим уровнем сохранности эффективной биозащитой и высокой антагонистической активностью у птиц кишечной микробиоты, а не интенсивным потреблением ими антибиотиков.

Рис. 4. Кутикулиты вызванные флавивирусной инфекцией и очаговые поражения печени ассоциируемые с иерсиниозом

Заключение
Комплекс мероприятий, нацеленных на борьбу с антибиотикорезистентными формами микроорганизмов, в первую очередь должен обеспечивать на птицефабрике биозащиту и минимизацию рисков развития устойчивости бактерий к антибиотикам при неправильном использовании данных препаратов.

Авторы:В. Н. Афонюшкин, кандидат биологических наук, зав. сектором молекулярной биологии, Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий РАН и Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, НовосибирскА. Н. Аксенов, руководитель отдела, ООО «КРКА Фарма», Москва

И. Н. Гусева, продакт-менеджер, ООО «КРКА Фарма», Москва

Библиографические ссылки:1. Афонюшкин В. Н., Аксенов А. Н., Филипенко М. Л. Обнаружение антител к флавивирусам у бройлеров с пониженной продуктивностью // Ветеринария. 2015. № 12. С. 24–27.2. Афонюшкин В. Н. Изучение видового разнообразия микрофлоры зерна // Птицеводство. 2010. № 10. С. 47–49.3.

Влияние дезинфицирующих средств на генетический материал патогенов, специфичных для мясоперерабатывающей промышленности / В. Н. Афонюшкин, К. А. Табанюхов, В. С. Черепушкина, Ю. С. Хоменко, О. П. Татарчук // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2016. № 1. С. 17–19.4.

Изменение устойчивости Salmonella enterica и Pseudomonas aeruginosa к антибактериальной и иммобилизационной активности хлорамфеникола / В. Н. Афонюшкин, И. Н. Троменшлегер, М. Л. Филиппенко, М. А. Титова // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 2013. № 5. С. 66–74.5. Обнаружение генов патогенности и антибиотикорезистентности S. enterica у некоторых микроорганизмов сем.

Enterobacteriaceae / В. Н. Афонюшкин, Ю. Г. Юшков, А. С. Донченко, Т. В. Сподырева, М. Л. Филипенко // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 2012. № 2. С. 67.6. Перспективы использования бактериофагов в качестве альтернативы антибиотиков / В. Н. Афонюшкин, Е. В. Дударева, В. С. Черепушкина, М. Л. Филипенко, Ю. Н. Козлова, С. М. Березин // Ветеринария. 2017. № 7.

С. 14–17.

7. Эпизоотии бактериальных эндокардитов / В. Н. Афонюшкин, Л. И. Малахеева, Е. В. Дударева, М. Л. Филипенко // Птицеводство. 2012. № 9. С. 41–44.

Источник: http://new.uralbiovet.ru/voprosy-borby-s-antibiotikorezistentnymi-mikroorganizmami-na-pticefabrikax-rf/

WikiBoliStop.Ru
Добавить комментарий